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双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法，操作步骤如下： 

1、将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 

2、加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 

3、加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 

4、加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。